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不依赖油水界面激活的黑曲霉脂肪酶突变体的构建: 作者：陈的舒正玉薛龙吟林瑞凤吴继光蒋咏梅李欣林跃鑫黄建忠 来源：生物工程学报 年份：2011 期刊类型：期刊 关键词： 界面活性黑曲霉脂肪酶 盖子结构域 重叠延伸聚合酶链式反应; 描述：为获得不依赖油水界面激活的黑曲霉脂肪酶(ANL)突变体,在生物信息学分析基础上,对黑曲霉脂肪酶盖子结构域两侧铰链区的氨基酸残基进行了置换突变,获得两个黑曲霉脂肪酶突变体(ANL-Ser84Gly和ANL-Asp99Pro)。对不同浓度对硝基苯丁酸酯的水解活性检测结果表明:ANL-Ser84Gly的催化活性仍依赖油水界面,而ANL-Asp99Pro的催化活性不再依赖油水界面。底物特异性检测结果表明:较ANL而言,ANL-Ser84Gly的比活力显著降低,其水解对硝基苯棕榈酸酯、对硝基苯豆蔻酸酯、对硝基苯月桂